吖啶酯化學(xué)發(fā)光試劑是體外診斷領(lǐng)域常用的一種檢測(cè)試劑,它的化學(xué)發(fā)光不像HRP或ALP的底物,可直接化學(xué)發(fā)光,那么吖啶酯的化學(xué)發(fā)光與熒光免疫中的熒光有什么區(qū)別呢?
化學(xué)發(fā)光是物質(zhì)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)時(shí)產(chǎn)物由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)的一種分子發(fā)光現(xiàn)象,其實(shí)分子發(fā)光有化學(xué)發(fā)光、熒光、磷光三種類型,它們的發(fā)光原理是不同的:
自然界中的化學(xué)發(fā)光
化學(xué)發(fā)光的原理
如德晟吖啶酯與過(guò)氧化氫兩種物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)生成另一種吖啶酯衍生物,反應(yīng)釋放的能量被這種產(chǎn)物的分子吸收并躍遷至激發(fā)態(tài),處于激發(fā)的分子再回到基態(tài)的過(guò)程中產(chǎn)生光輻射。這里產(chǎn)物是發(fā)光體,此過(guò)程中由于發(fā)光產(chǎn)物直接參與反應(yīng),故稱直接化學(xué)發(fā)光。魯米諾的發(fā)光原理也是類似的,不過(guò)需要HRP或POD的催化,故稱為酶促化學(xué)發(fā)光。
熒光的原理
光照射到某些原子時(shí),光的能量使原子核周圍的一些電子由原來(lái)的軌道躍遷到了能量更高的軌道,即從基態(tài)躍遷到第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等。第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等是不穩(wěn)定的,所以會(huì)恢復(fù)基態(tài),當(dāng)電子由第一激發(fā)單線態(tài)恢復(fù)到基態(tài)時(shí),能量會(huì)以光的形式釋放,所以產(chǎn)生熒光。
磷光的原理
當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長(zhǎng)的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài)(通常具有和基態(tài)不同的自旋多重度),然后緩慢地退激發(fā)并發(fā)出比入射光的波長(zhǎng)長(zhǎng)的出射光。
看到這里,很多人可能還是不會(huì)區(qū)分,但是沒(méi)有關(guān)系。舉例來(lái)說(shuō),螢火蟲(chóng)的發(fā)光就屬于生物發(fā)光或化學(xué)發(fā)光,磷火或“鬼火”也是化學(xué)發(fā)光,熒光棒也是化學(xué)發(fā)光;紫外線照射人民幣防偽標(biāo)識(shí)發(fā)光的是熒光;夜光筆、夜光手表這類屬于磷光。在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光。
在分析檢測(cè)領(lǐng)域,化學(xué)發(fā)光免疫和熒光免疫就是兩種不同的檢測(cè)方法了,需要加以區(qū)別。德晟的魯米諾和吖啶酯都屬于化學(xué)發(fā)光試劑,和熒光免疫的試劑是不同體系的試劑。