在吖啶酯化學(xué)發(fā)光免疫中,通常是將吖啶酯作為指示物來標(biāo)記抗體,但其實(shí)吖啶酯也是可以標(biāo)記抗原的,那么吖啶酯標(biāo)記抗原和標(biāo)記抗體有什么區(qū)別呢?
吖啶酯標(biāo)記抗原和標(biāo)記抗體在標(biāo)記原理以及最終的光檢測上都是相似的,區(qū)別主要是在免疫分析測定法的不同。通常吖啶酯標(biāo)記抗體是用于雙抗體夾心法測定,而吖啶酯標(biāo)記抗原是用于競爭法測定。
化學(xué)發(fā)光試劑吖啶酯標(biāo)記抗體
雙抗夾心法:
雙抗夾心法通常是檢測抗原,免疫組分有三種:固相抗體(特異性抗體與固相載體結(jié)合),受檢樣本(即需要被檢測的抗原),用吖啶酯進(jìn)行標(biāo)記的抗體。這三種會(huì)形成兩種抗體夾著抗原的免疫復(fù)合物,該復(fù)合物中的抗體由于被吖啶酯標(biāo)記,可以通過吖啶酯的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)分析含量,從而計(jì)算待測樣本中抗原含量。
有時(shí)也可以加入二抗(第二抗體,抗體的抗體,作為抗原與抗體結(jié)合不與抗原結(jié)合)作為固相載體,一抗固定于測試線T線,二抗作為對照線C線(質(zhì)控線),這樣德晟吖啶酯標(biāo)記抗體過量時(shí)會(huì)繼續(xù)與二抗結(jié)合,通過測試線和對照線中吖啶酯發(fā)光強(qiáng)度比值來分析計(jì)算待測抗原的濃度。
舉例:艾滋病的抗原HIV-1p24檢測就是采用的雙抗夾心法,不使用吖啶酯標(biāo)記抗原,而是標(biāo)記抗p24抗體。
競爭法:
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。比如說檢測抗原,可以將待測抗原和吖啶酯標(biāo)記的抗原以競爭形式與固相抗體結(jié)合,這兩種抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的吖啶酯標(biāo)記抗原的量與受檢抗原的量呈反比。德晟吖啶酯標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物可通過化學(xué)發(fā)光測得,根據(jù)反比關(guān)系可計(jì)算待測抗原含量。
可以看出同樣是檢測抗原,一個(gè)是用吖啶酯標(biāo)記抗體,一個(gè)是吖啶酯標(biāo)記抗原,測定方法不一樣標(biāo)記的對象不一樣,對于抗體檢測也是類似的,不是檢測什么就標(biāo)記什么。德晟目前提供的有六種吖啶酯,可滿足多種不同抗原、抗體的標(biāo)記和檢測。