化學發(fā)光試劑吖啶酯是CLIA中重要的檢測試劑，外觀成黃色粉末，它的檢測靈敏度非常高，逐漸成為國內(nèi)體外診斷領域主流的檢測手段。能被吖啶酯檢測標記的對象包括蛋白質、抗體、核酸DNA或RNA等，適應范圍廣。

在體外診斷方面，吖啶酯化學發(fā)光試劑很適合于標記DNA鏈以制造化學發(fā)光DNA探針，本文將介紹一種德晟吖啶酯標記核酸的方法。

化學發(fā)光試劑吖啶酯

核酸是所有生物分子中重要的物質，廣泛存在于所有動植物細胞、微生物體內(nèi)，核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類?，F(xiàn)代醫(yī)學研究成果表明，許多疾病如癌癥和遺傳疾病的發(fā)生都與DNA的突變有關，且許多傳染性疾病是由環(huán)境中的病毒、病菌或寄生蟲引起的，因此，對病毒特定序列DNA的分析有利于疫情的控制。

在核酸雜交分析中，制備特異性強、靈敏度高的標記探針是核酸雜交分析成功的關鍵，吖啶酯衍生物可以直接標記在核酸探針上，不需催化劑且發(fā)光量子產(chǎn)率不受影響；另外，在一定條件下，未雜交的單鏈DNA上標記的吖啶酯被水解破壞，只有雜交形成的雙鏈保護的吖啶酯才能產(chǎn)生化學發(fā)光，不需分離即可監(jiān)測整個雜交過程。

這種吖啶酯標記核酸的方法，主要包括3個步驟，分別對DNA探針5’端、3’端進行保護；然后進行吖啶酯標記，后面HPLC純化分離DNA。其中吖啶酯標記較為關鍵，將25mM 吖啶酯溶解于二甲基亞砜（DMSO）中，配置1M HEPES緩沖液(PH＝8.0)，按照摩爾比核酸探針：吖啶酯＝1:5的條件，加入到HEPES緩沖液中，37℃溫度下反應1h。

這種方法創(chuàng)造性的在DNA兩端都標記了吖啶酯，進一步提升了檢測的靈敏度。吖啶酯具有反應條件溫和、重現(xiàn)性好、發(fā)光效率高、發(fā)光強度強等優(yōu)點，廣泛應用于無機有機化合物、環(huán)境監(jiān)測、生物及藥物分析等領域，另外也普遍用于多種類型疾病的靈敏檢測和診斷。

吖啶酯化學發(fā)光試劑包含吖啶酯與吖啶磺酰胺兩種類型，德晟研發(fā)的共有六種吖啶酯試劑，可滿足標記蛋白質、抗體、核酸等分子的不同需求。