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緩沖劑HEPES(7365-45-9)對(duì)細(xì)胞內(nèi)朊蛋白的抑制效果

發(fā)表時(shí)間:2021-08-30

是一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的緩沖試劑,它的緩沖范圍是6.8-8.2之間,在開(kāi)放式的細(xì)胞培養(yǎng)條件中,它的PH值常常會(huì)受到外界的影響,如若加入HEPES緩沖劑,即可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高,所以在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常少不了HEPES緩沖液。除此之外在有機(jī)分子攝取、氧化應(yīng)激機(jī)制的改變或離子的抑制中使用也很廣泛。

HEPE的緩沖液,與碳酸氫鹽相比,它溶解度更高更穩(wěn)定的,并且與金屬離子的絡(luò)合最小,在不同的使用情況下證明HEPES可以負(fù)責(zé)生物技術(shù)的重大修改有機(jī)分子的吸收等參數(shù),對(duì)氧化應(yīng)激機(jī)制和離子通道抑制目前已有幾種分子機(jī)制。

朊病毒又稱(chēng)朊粒、蛋白質(zhì)侵染因子、毒朊或感染性蛋白質(zhì),是一類(lèi)能侵染動(dòng)物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無(wú)免疫性疏水蛋白質(zhì)。在我們實(shí)驗(yàn)室尋求朊病毒基因治療方法的過(guò)程中,我們使用含有相關(guān)蛋白的HEK 293T上清液朊病毒感染細(xì)胞上的慢病毒,在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,單獨(dú)使用無(wú)關(guān)的慢病毒或培養(yǎng)基觀(guān)察到一個(gè)顯著的抑制作用的積累朊蛋白(PrPSc)的異常亞型最終確認(rèn)與培養(yǎng)基中HEPE的存在有關(guān)。

當(dāng)在朊病毒感染的細(xì)胞上使用添加HEPES的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí),有一個(gè)顯著的濃度依賴(lài)性抑制的積累,朊蛋白異常亞型(PrPSc)。這種效應(yīng)只存在于活細(xì)胞中,并且沒(méi)有被證實(shí)被認(rèn)為與PrP環(huán)境或生物學(xué)的改變有關(guān)。HEPES的這種抑制作用也可以用來(lái)防止細(xì)胞培養(yǎng)中朊病毒的污染或繁殖。

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