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吖啶酯在鏈霉親和素中的作用

發(fā)表時(shí)間:2021-06-21

化學(xué)發(fā)光分析CLIA是目前市場前景非常好的免疫分析方法,管式化學(xué)發(fā)光磁珠法中通常會用到鏈霉親和素和生物素,這里介紹CLIA中鏈霉親和素其作用。

吖啶酯的化學(xué)發(fā)光與魯米諾不一樣,魯米諾是輝光型,可長時(shí)間發(fā)光,而吖啶酯屬于閃光性,發(fā)光時(shí)間短發(fā)光迅速,通常只有數(shù)秒。吖啶酯體系在堿性條件下加入激發(fā)劑過氧化氫0.4s后發(fā)射光強(qiáng)度達(dá)到最大,半衰期為0.9s2s內(nèi)發(fā)光基本結(jié)束,可以實(shí)現(xiàn)快速檢測。吖啶酯與鏈霉親和素結(jié)合后,可使其擁有更好的性能。

鏈霉親和素在吖啶酯發(fā)光中的放大作用:

鏈霉親和素是由鏈霉菌分泌的一種蛋白質(zhì),它能與生物素發(fā)生特異性結(jié)合,它們之間的結(jié)合力是目前已知的最強(qiáng)的非共價(jià)鍵結(jié)合力。因?yàn)檫@一特性,鏈霉親和素-生物素反應(yīng)體系在純化和檢測領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。鏈霉親和素以同源四聚體的形式存在,每摩爾的四聚體分子可結(jié)合4摩爾的生物素分子,所以在免疫檢測領(lǐng)域具有信號放大作用。

吖啶酯化學(xué)發(fā)光、鏈霉親和素磁珠-生物素放大反應(yīng)體系包括:吖啶酯標(biāo)記的抗體或抗原、生物素標(biāo)記的抗體或抗原、鏈霉親和素包被帶有羧基或者Tosyl(對甲苯磺?;┕倌軋F(tuán)的磁珠;所述的磁珠粒徑0.1-5μm。由于生物素和鏈霉親和素是以4:1的比例像結(jié)合,所以吖啶酯-生物素-抗原抗體復(fù)合物也是以4倍的比例與鏈霉親和素結(jié)合,這樣發(fā)光信號也擴(kuò)大了4倍,檢測靈敏度更高。

吖啶酯的免疫分析技術(shù)本身的靈敏度和特異性就非常高,引入了特異性結(jié)合的鏈霉親和素-生物素系統(tǒng)后,放大了檢測信號,使吖啶酯的CLIA有了更好的實(shí)用性。德晟致力于CLIA及磁珠的研究,已有多款吖啶酯試劑受到市場好評。

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