在生物實(shí)驗(yàn)中會(huì)經(jīng)常被用到，它們種類繁多，可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合，實(shí)際使用時(shí)就存在一定的差異，所以選好合適的緩沖劑是很有必要的；同時(shí)，不同緩沖液差別也很大。德晟帶你來(lái)聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區(qū)別。 

Tris-HCl緩沖液

是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。

優(yōu)點(diǎn)                  

1、 Tris-HCl緩沖液穩(wěn)定，與生理體液的相容性好（Tris-HCl與鈣、鎂離子不會(huì)形成沉淀；相反，磷酸鹽與鈣、鎂離子會(huì)產(chǎn)生沉淀）；

2、而且相同PH，相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強(qiáng)度低，這對(duì)酶類測(cè)定尤為重要，因?yàn)榇箅x子強(qiáng)度易致有些酶失活。因此，有時(shí)用Tris-HCl代替磷酸鹽緩沖液，效果更好。

Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)：

1、溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.4

2、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；

3、對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

4、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。 

HEPES緩沖液

HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。

優(yōu)點(diǎn)：

pKa值介于6.0和8.0之間；

在水中具有高溶解度；

具有膜不透性，不易穿透生物膜；

對(duì)生化反應(yīng)影響有限，可耐化學(xué)和酶解作用，且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀；

有極低的可見(jiàn)光和紫外光吸收；

離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小;

HEPES緩沖液缺點(diǎn)：

如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí)，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2；

HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

而配置成溶劑后，要在4℃下保存，建議在短期內(nèi)使用效果更佳；

HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi)，不能直接長(zhǎng)時(shí)間照射陽(yáng)光。