體外診斷中,酶的底物有很多種,包括ADPS、MAOS,發(fā)光底物魯米諾、異魯米諾,直接發(fā)光試劑吖啶酯等。這些底物實(shí)驗(yàn)時都需要配成溶液,那么它們的溶解性能就是一個關(guān)鍵因素了。
德晟的研發(fā)項(xiàng)目之一是對傳統(tǒng)的一些試劑進(jìn)行改性,使它們用于生化檢測時性能更好,使用更方便,通過官能團(tuán)修飾改變親水性就是其中一種試劑改性方式。ADPS、魯米諾、吖啶酯這些底物,它們的親水性或者溶解性都是不同的。
底物ADPS、魯米諾、吖啶酯的溶解性
顯色底物比如ADPS、TOOS、DAOS及MAOS等都屬于新型Trinder’s試劑,是在傳統(tǒng)色原苯酚、苯胺及其衍生物的基礎(chǔ)上研發(fā)出來的高水溶性的苯胺鈉鹽,使用時可以直接配成水溶液或者溶于緩沖溶液。
發(fā)光底物魯米諾及異魯米諾,在水中的溶解度小于0.1g/100mL,易溶于有機(jī)溶劑,但是可以溶于堿性溶液中。因此將做魯米諾化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)或制備魯米諾的ECL發(fā)光液時,需要用NaOH來配置堿液。還有一種情況是,將魯米諾制成魯米諾鈉鹽,這也能大大增加魯米諾的水溶性,可直接用于中性溶液。
發(fā)光底物吖啶酯,其實(shí)它可以直接化學(xué)發(fā)光反應(yīng),嚴(yán)格說不算的酶的底物,是在魯米諾之后發(fā)展出的發(fā)光試劑。吖啶酯水溶性很差,使用時先溶于無水DMF(N,N-二甲基甲酰胺),我們的吖啶酯3~6 號在 1~2 號的基礎(chǔ)上,在親水性上進(jìn)行了修飾,引入了丙磺酸內(nèi)鹽,增加了其水溶性,使其與抗體、 核酸等形成的標(biāo)志物有水溶性,在之后的發(fā)光檢測可以在水中進(jìn)行。
物質(zhì)的溶解通常遵循相似相溶原理,極性溶劑溶解極性物質(zhì),非極性溶劑溶解非極性物質(zhì),含有相同官能團(tuán)的物質(zhì)互溶。試劑極性從小到大:烷、烯、醚、酯、酮、醛、胺、醇和酚、酸,例如:己烷-石油醚、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇、水。