在最近有客戶反應(yīng)，自己配置好的EHSPT（也叫TOOS）溶液本來是透明的，可是放置了兩天后變成黃色或紅色了，這是什么原因，是否還能使用呢？

溶液變色原因：

像EHSPT、MAOS等顯色底物都屬于新型Trinder’s試劑，都屬于高水溶性苯胺鈉鹽的衍生物，被氧化后會產(chǎn)生紅色或黃色的物質(zhì)。Trinder’s試劑粉末是不容易被氧化的，配制成溶液后需要密封冷藏，盡量配多少用多少；如果溶液長時間暴露在空氣中且溫度偏高的話，它們可能會被空氣中的氧緩慢氧化，從而出現(xiàn)溶液變色的情況。

Trinder’s試劑用于酶聯(lián)免疫分析

Trinder's試劑檢測原理：

EHSPT、MAOS等Trinder's試劑，可以在過氧化物酶存在下，被過氧化氫氧化（TOOS、MAOS等需要與4-AAP偶聯(lián)）氧化生成紅色醌亞胺物質(zhì)，從而通過光度計測量吸光度來檢測能生成或氧化氫的被測樣品的含量。

新型Trinder’s試劑都是具有還原性的顯色試劑，原本是沒有顏色的，當它們在過氧化物酶催化作用下被氧之后，就能生成有顏色的氧化產(chǎn)物。但是EHSPT等色原底物在溶液中相對不夠穩(wěn)定，被氧化性雜質(zhì)污染或者長時間接觸空氣，會使它們緩慢氧化，從而溶液發(fā)生變色。因此，色原底物在配成溶液時，一般建議現(xiàn)配現(xiàn)用，防止其被污染或者氧化變質(zhì)。

Trinder's試劑相比于TMB的優(yōu)勢：

用TMB作顯色試劑時，檢測的波長為450nm的最大吸收波長和405nm波長，而血清中膽紅素的吸收波長在380~530nm，會對檢測結(jié)果造成干擾，且要在酸性條件下做顏色反應(yīng)，限制了它的應(yīng)用。新型Trinder’s試劑的顏色反應(yīng)產(chǎn)物的紫外吸收＞540nm，MAOS、MADB甚至高達630nm，且反應(yīng)對PH范圍要求較寬，受血清中其他物質(zhì)干擾更小，可以針對需要高精確值的檢測項。

目前除了化學(xué)發(fā)光免疫分析外，用的較多的就是酶聯(lián)免疫分析，新型Trinder’s試劑是其中重要的顯色底物，德晟在吖啶酯化學(xué)發(fā)光試劑和新型Trinder’s試劑的研發(fā)生產(chǎn)及銷售方面都有豐富經(jīng)驗。