目前國內(nèi)的化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)已突飛猛進(jìn),逐步與國際發(fā)達(dá)國家水平接軌,其中化學(xué)發(fā)光試劑主要圍繞吖啶酯類發(fā)光試劑和魯米諾類試劑展開,那么誰將成為的核心C位呢?
吖啶酯化學(xué)發(fā)光試劑
魯米諾與吖啶酯的區(qū)別:
吖啶酯類和魯米諾都是化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)分析CLIA中應(yīng)用非常廣泛的發(fā)光試劑,兩者有很大的區(qū)別,吖啶酯與魯米諾相比,最直觀的是靈敏度要高很多。
吖啶酯的價(jià)格遠(yuǎn)高于魯米諾,吖啶酯類發(fā)光試劑的價(jià)格通常以毫克或克計(jì)價(jià),平均每毫克幾百元;而魯米諾則是以克或千克計(jì)價(jià),克價(jià)在幾十到上百不等,所以說價(jià)差還是比較大的。
魯米諾、異魯米諾及其衍生物是最早使用的一類化學(xué)發(fā)光物質(zhì),需要使用催化劑過氧化物酶POD及增強(qiáng)劑,這將導(dǎo)致背景發(fā)光增強(qiáng),使測(cè)量本底升高,從而限制了這一技術(shù)的靈敏度和它的應(yīng)用及發(fā)展。
吖啶酯的發(fā)光效率高,且發(fā)光體系簡(jiǎn)單,不需要加入催化劑,本底低,標(biāo)記簡(jiǎn)單。由于傳統(tǒng)吖啶酯AE-NHS的熱穩(wěn)定性不是很好,此后又相繼研究合成了較AE-NHS更穩(wěn)定的吖啶酯衍生物并應(yīng)用于CLIA。例如DMAE-NHS被證明具有良好的熱穩(wěn)定性和發(fā)光性能。
吖啶類發(fā)光試劑反應(yīng)靈敏度非常高,激發(fā)液的加入導(dǎo)致反應(yīng)體系立即釋放約430nm的光子,通過使用標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)(luminometer)計(jì)數(shù)光子數(shù)量就可檢測(cè)蛋白質(zhì)的濃度。因?yàn)榇税l(fā)光過程是十分短暫(整個(gè)過程在2秒鐘內(nèi)完成),樣品必須直接放在光度計(jì)內(nèi)部光子探測(cè)器前面。蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸都可以用吖啶酯標(biāo)記。標(biāo)記化合物在堿性過氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光,通過收集光子可以檢測(cè)到標(biāo)記化合物。
吖啶酯在CLIA中各方面性能顯然是優(yōu)于魯米諾的,不過它的價(jià)格和需要的設(shè)備成本更高一些, 在一些檢測(cè)要求相對(duì)低一點(diǎn)的情況是不需要用吖啶酯的。吖啶酯和魯米諾這兩類試劑德晟都有研發(fā)提供,可以滿足不同的檢測(cè)需求。