在臨床檢驗(yàn)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,抗凝劑有很重要的作用,它們能夠阻止血液凝固,以便進(jìn)行各種血液檢測(cè)和分析。EDTA K2抗凝劑是常用的一種,與其他抗凝劑,如肝素鋰、肝素鈉、枸櫞酸鈉等抗凝劑相比,它具有獨(dú)特的性能和特點(diǎn)。并且這幾種抗凝劑在抗凝機(jī)制、對(duì)血細(xì)胞的影響、適用的檢測(cè)項(xiàng)目以及穩(wěn)定性與保存條件等方面都存在差異。
一、抗凝機(jī)制
1、EDTA K2抗凝機(jī)制:EDTA(乙二胺四乙酸)K2主要通過與血液中的鈣離子(Ca2?)螯合來發(fā)揮抗凝作用。鈣離子在血液凝固過程中是多個(gè)凝血因子激活所必需的,EDTA K2與 Ca2?形成穩(wěn)定的螯合物,從而阻斷了凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)的進(jìn)行。這種抗凝機(jī)制能夠在不明顯影響血液中其他成分的情況下有效地抑制血液凝固。例如,在血常規(guī)檢測(cè)中,EDTA K2抗凝的血液樣本可以準(zhǔn)確地反映紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的數(shù)量和形態(tài),因?yàn)樗鼘?duì)這些細(xì)胞成分的直接影響較小。
2、肝素抗凝機(jī)制:肝素則主要通過增強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)的活性來抗凝??鼓涪竽軌蛞种贫喾N凝血因子,如凝血酶(Ⅱa)、因子Ⅹa、Ⅸa、Ⅺa 和Ⅻa 等。肝素與 ATⅢ結(jié)合后,使 ATⅢ的構(gòu)型發(fā)生改變,顯著提高其對(duì)凝血因子的抑制作用,從而阻止血液凝固。肝素的抗凝作用迅速且強(qiáng)大,但它的作用相對(duì)較為復(fù)雜,可能會(huì)對(duì)一些凝血相關(guān)的檢測(cè)產(chǎn)生較大影響,如進(jìn)行凝血功能檢測(cè) APTT(活化部分凝血活酶時(shí)間)、PT(凝血酶原時(shí)間)。
3、枸櫞酸鈉抗凝機(jī)制:枸櫞酸鈉是通過與血液中的鈣離子結(jié)合形成難解離的可溶性絡(luò)合物,從而降低血液中的鈣離子濃度,達(dá)到抗凝目的。其抗凝效果相對(duì)較弱,主要用于凝血功能檢測(cè)等特定項(xiàng)目。
二、對(duì)血細(xì)胞的影響
1、對(duì)紅細(xì)胞的影響:EDTA K2對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)影響最小。在顯微鏡下觀察,EDTA K2抗凝的紅細(xì)胞能夠保持其正常的形態(tài),這使得在進(jìn)行紅細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、紅細(xì)胞壓積以及紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查時(shí),能夠獲得較為準(zhǔn)確的結(jié)果。
2、對(duì)白細(xì)胞的影響:EDTA K2不影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)及大小,能夠使白細(xì)胞在樣本中均勻分布,便于進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和總數(shù)測(cè)定。白細(xì)胞的各類細(xì)胞在 EDTA K2抗凝的血液中能夠保持其正常的形態(tài)和特性,有利于通過血液分析儀準(zhǔn)確識(shí)別和分類。肝素和枸櫞酸鈉可能不太適用于白細(xì)胞檢測(cè)。
3、對(duì)血小板的影響:EDTA K2可以抑制血小板的聚集,便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板數(shù)量。同時(shí),它對(duì)血小板形態(tài)的影響也較小,有利于進(jìn)行血小板形態(tài)學(xué)檢查。而肝素會(huì)導(dǎo)致血小板聚集,使血小板計(jì)數(shù)偏低,并且會(huì)引起血小板形態(tài)發(fā)生改變,不利于血小板相關(guān)疾病的診斷。枸櫞酸鈉抗凝時(shí),血小板也可能會(huì)有一定程度的聚集。
三、適用的檢測(cè)項(xiàng)目
1、EDTA K2適用項(xiàng)目:由于其對(duì)血細(xì)胞形態(tài)和計(jì)數(shù)影響小的特點(diǎn),EDTA K2抗凝劑適用于大多數(shù)常規(guī)血液學(xué)檢驗(yàn),如血常規(guī)、血型鑒定等。在這些檢測(cè)中,EDTA K2能夠提供穩(wěn)定且準(zhǔn)確的血液樣本。例如,在血常規(guī)檢測(cè)中,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都采用 EDTA K2抗凝的血液樣本,確保各項(xiàng)血細(xì)胞指標(biāo)的準(zhǔn)確測(cè)定。
2、肝素適用項(xiàng)目:肝素主要適用于一些需要快速抗凝且對(duì)凝血功能檢測(cè)有特殊要求的項(xiàng)目,以及一些特殊的凝血功能檢測(cè)如抗凝血酶Ⅲ活性測(cè)定等,如在血漿測(cè)試中推薦使用,以及用于血糖、電解質(zhì)檢測(cè)等項(xiàng)目。
3、枸櫞酸鈉適用項(xiàng)目:枸櫞酸鈉主要用于凝血功能檢測(cè)項(xiàng)目,如 PT、APTT、凝血酶時(shí)間(TT)等。在這些檢測(cè)中,嚴(yán)格控制枸櫞酸鈉與血液的比例(通常為 1:9)是關(guān)鍵,因?yàn)檫@直接影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外,枸櫞酸鈉也可用于紅細(xì)胞沉降率(ESR)測(cè)定,它能夠使血液在特定條件下形成穩(wěn)定的血漿層和紅細(xì)胞層,便于觀察紅細(xì)胞沉降的速度。
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