在臨床檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室分析中,抗凝劑的使用很普遍。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)是一種常用的抗凝劑,主要用于血液樣本的保存和分析。EDTA二鉀能夠螯合血液中的鈣離子,阻止凝血過程。然而,廠家制備時(shí)一些新手很容易忽視EDTA二鉀與血液的比例問題。
一、EDTA二鉀抗凝劑的作用原理
EDTA(乙二胺四乙酸)是一種強(qiáng)有力的螯合劑,能夠與金屬離子(如鈣離子)形成穩(wěn)定的絡(luò)合物,從而阻止凝血酶原向凝血酶的轉(zhuǎn)化,抑制凝血過程。EDTA二鉀是EDTA的二鉀鹽形式,常用于血液標(biāo)本的抗凝處理,特別是在血液常規(guī)檢查、血液生化分析、血型鑒定和分子生物學(xué)檢測等方面具有廣泛應(yīng)用。
二、影響EDTA二鉀與血液比例不對(duì)的原因
在實(shí)際操作中,影響的主要原因有以下幾點(diǎn):
1、添加量不準(zhǔn)確:在手工操作或自動(dòng)化儀器中,EDTA二鉀的添加量如果不準(zhǔn)確,會(huì)導(dǎo)致比例失調(diào)。一般根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)劑量范圍為每毫升血液加入1.5-2.2mg EDTA 二鉀。
2、血液量不足:采血過程中,如果血液量不足,導(dǎo)致抗凝劑相對(duì)過量。
3、混合不均勻:采血后未能充分混勻,導(dǎo)致抗凝劑在血液中分布不均。
三、EDTA二鉀與血液比例不對(duì)的影響
1、血液稀釋效應(yīng):EDTA二鉀比例過高時(shí),會(huì)造成血液樣本的稀釋效應(yīng),這會(huì)直接影響血液細(xì)胞計(jì)數(shù)和血液生化參數(shù)的測定。例如,血常規(guī)檢測中,白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的計(jì)數(shù)結(jié)果會(huì)被低估,導(dǎo)致誤診或漏診。
2、紅細(xì)胞形態(tài)改變:過高濃度的EDTA二鉀會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞發(fā)生皺縮和形態(tài)改變,影響紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。紅細(xì)胞形態(tài)的改變會(huì)干擾血涂片的顯微鏡觀察,使得紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析結(jié)果不準(zhǔn)確。
3、血小板聚集:比例過高的EDTA二鉀可能導(dǎo)致血小板的聚集,從而影響血小板計(jì)數(shù)和功能檢測。血小板聚集會(huì)干擾血小板計(jì)數(shù)儀的正常工作,導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確。
4、血液化學(xué)指標(biāo)變化:EDTA二鉀對(duì)某些血液化學(xué)指標(biāo)也有直接影響。例如,EDTA會(huì)螯合血液中的鈣離子,使得鈣離子濃度測定結(jié)果顯著降低。此外,EDTA二鉀過量還可能影響其他金屬離子的測定,如鎂、鋅等,進(jìn)而影響相關(guān)生化指標(biāo)的準(zhǔn)確性。
四、防止EDTA二鉀與血液比例不對(duì)的措施
1、準(zhǔn)確控制EDTA二鉀的添加量:無論是手工操作還是自動(dòng)化儀器,都應(yīng)確保EDTA二鉀的添加量準(zhǔn)確無誤。可以采用精密的移液器或自動(dòng)分液器,嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)進(jìn)行操作,避免因添加量不準(zhǔn)確而導(dǎo)致的比例失調(diào)。
2、確保采血量充足:采血過程中應(yīng)確保采血管中的血液量達(dá)到標(biāo)定量,避免因血液量不足導(dǎo)致的抗凝劑過量??稍诓裳罅⒓礄z查血液量,若有需要應(yīng)重新采血。
3、充分混勻:采血后應(yīng)立即輕輕倒置混勻采血管,確保EDTA二鉀在血液中均勻分布,通常建議倒置混勻5-10次,使抗凝劑與血液充分接觸,從而避免局部濃度過高。
4、定期校準(zhǔn)檢測設(shè)備:定期校準(zhǔn)血液分析設(shè)備,確保設(shè)備在較佳狀態(tài)下運(yùn)行,避免因設(shè)備故障或校準(zhǔn)不準(zhǔn)導(dǎo)致的檢測誤差。
EDTA二鉀抗凝劑在血液樣本處理中的應(yīng)用十分廣泛,但其與血液的比例要嚴(yán)格控制,才能確保樣本的質(zhì)量和檢測結(jié)果。通過準(zhǔn)確控制添加量、確保采血量充足、充分混勻樣本以及定期校準(zhǔn)檢測設(shè)備等方式,可以避免因比例不對(duì)導(dǎo)致的問題。
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