色原底物ADPS是辣根過氧化物酶HRP或過氧化物酶POD常用的顯色底物,化學(xué)名稱是N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺鈉鹽二水合物,高水溶性,是一種新型Trinder’s試劑。
耦聯(lián)氧化系統(tǒng):
ADPS是在傳統(tǒng)的Trinder’s試劑苯酚或苯胺的基礎(chǔ)上研發(fā)出的新型Trinder’s試劑,生化檢測中用于過氧化氫H2O2耦聯(lián)的指示系統(tǒng)。這個系統(tǒng)用的非常廣泛,包含傳統(tǒng)色原苯酚,德晟新型Trinder’s試劑(如ADPS試劑、MAOS、TOOS等)等。
HRP酶的色原底物ADPS的顯色原理
H2O2在過氧化物酶的作用下,可使單一個或成對的無色的色素原氧化成有色的色素,導(dǎo)致某一波長吸光度的增加,因此可用來測定物質(zhì)的濃度或活性。用于此指示系統(tǒng)的單一色素原有TMB、ABTS等;成對色素原有酚和4AA、MBTH和DMA等。
應(yīng)用此系統(tǒng)的臨床項目有:TC(血清總膽固醇)、TG(甘油三酯)、HDL-C(高密度脂蛋白膽固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白膽固醇)、Glu(血糖)、Cr(肌酐)、UA(尿酸)等。
ADPS顯色原理:
H2O2在POD的催化作用下,ADPS與4AA(4-氨基安替吡啉)耦聯(lián)氧化生成醌亞胺類物質(zhì),導(dǎo)致500nm處吸光度增加。以Glu(血糖)的檢測為例,Glu與氧氣、水在GOD催化下生成葡萄糖酸和雙氧水H2O2(過氧化氫),生成的過氧化氫則可以用ADPS的耦聯(lián)氧化系統(tǒng)測定,吸光度增加的程度與Glu成正比,用分光廣度法測吸光度的增加量即可測量血糖含量。
除了德晟ADPS之外,新型Trinder’s試劑還有TOOS,MAOS,MADB等,在過氧化氫和POD的存在下能與4-氨基安替比林 (4-AA) 或3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH) 的氧化偶合反應(yīng)過,形成非常穩(wěn)定的紫色或藍色染料(與MBTH偶合染料的摩爾吸光度比與4-AA偶合染料的高1.5-2倍;然而,4-AA溶液比MBTH溶液更穩(wěn)定)。
葡萄糖、酒精、酰基-輔酶A和膽固醇等可以用作檢測與新型Trinder's試劑及4-AA偶合的那些底物。德晟生化現(xiàn)有包括ADPS在內(nèi)的10種新型Trinder's試劑,以及吸收波長更高的DA64和DA67。