干貨分享!hepes緩沖液配比詳解
在日常實驗操作過程中使用較為頻繁的就是緩沖液,但因其類型較多,像常見的有:磷酸鹽、硼酸鹽、Tris、HEPES等溶液,通常會根據(jù)實驗要求來進行選擇。這主要是因為緩沖液的選擇錯誤會造成實驗結果的偏差,如使用pH值相同的類型溶液,但因為某種離子導致沉淀現(xiàn)象,就可能使實驗產生不需要的化學反應,影響實驗操作。由于hepes溶液近期使用操作誤區(qū)較多,所以下面就詳細給大家介紹一下它。
作為一種非離子型的兩性溶液,其pH值在7.2-7.4之間,是大多數(shù)實驗中的選擇溶液,例如用于生化診斷試劑盒和細胞培養(yǎng)液中。尤其是在開放式細胞培養(yǎng)中它可以較為穩(wěn)定的維持pH值,并對細胞無毒性作用。具體的配比詳解如下:
1、以配制500毫升的HEPES,PH等于7的儲備溶液為例。首先準備119g的粉末溶解到400毫升的去離子水中,然后加入0.5-1M的氫氧化鈉溶液,將其調節(jié)至所需要的pH值,再加入去離子水定容,在4度條件下保存即可。
2、如果是要在HEPES中加入少量鹽,以500毫升為例,其配比方法為準備HEPES溶液6.5g,氯化鈉8g,磷酸氫二鈉七水合物0.19g,然后使用0.5M的氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值,進行定容。
3、如果是2×HEPES緩沖鹽溶液的配制,需按照氯化鈉1.6g,氯化鉀0.074g,磷酸氫二鈉二水合物0.027g和1g的HEPES充分溶解至90毫升的去離子水中,然后用0.5M氫氧化鈉溶液調節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容即可。
4、100 x HEPES貯存液配比為取23g的HEPES溶于90ml雙蒸水中,然后添加1M氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值到7.5-8.0,加去離子水定容至100ml,過濾除菌,在4℃或-20℃保存下保存即可。
上述整理的配比方法較為普遍,但具體使用時要根據(jù)實驗要求進行靈活配比。德晟作為生物緩沖液的生產商,所涉及的產品有Tris、Caps、Bicine、Mops、Hepes等多種,可完全滿足客戶實驗要求,提供一站式采購,不僅節(jié)約時間,還降低了采購成本。同時為保證產品質量問題,質檢人員對每批產品重復檢測,使用時不會產生干擾檢測結果的現(xiàn)象。如果您有意向,歡迎點擊咨詢購買!