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生物緩沖液( PB、Tris、甘氨酸)的作用及優(yōu)缺點(diǎn)

發(fā)表時(shí)間:2021-09-03

是一種能在加入少量酸或堿時(shí)保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定的溶液,多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的pH范圍內(nèi)進(jìn)行活動(dòng),需要有緩沖體系來(lái)抵抗在代謝過(guò)程中出現(xiàn)的pH變化。在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。生物緩沖液的種類多,用途廣,需根據(jù)實(shí)際應(yīng)用選擇合適的體系。

1.  PB緩沖液(磷酸鹽緩沖液)

磷酸鹽緩沖液又稱PB緩沖液,是應(yīng)用很廣泛的緩沖液。由于其二次離解作用,緩沖液pH值范圍較寬,可配置不同pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。

PB緩沖液的優(yōu)點(diǎn):

①易于配制成各種濃度 ;

pH值范圍寬;

pH受溫度的影響小。

PB緩沖液的缺點(diǎn):

①易與常見(jiàn)的鈣、鎂、重金屬離子形成沉淀;

②抑制某些生化過(guò)程。

2. 

Tris緩沖液在生物化學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用。它是弱堿,通常在“中性”范圍內(nèi)使用。

Tris緩沖液的優(yōu)點(diǎn): 

①因?yàn)?span>Tris堿的堿性較強(qiáng),所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液;

②對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

Tris緩沖液的缺點(diǎn):

①緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1

②溫度效應(yīng)大,溫度變化對(duì)緩沖液pH值的影響很大,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃;

③易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封;

④它對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

3. 

甘氨酸緩沖液pH值范圍廣,應(yīng)用范圍廣。pH值范圍為2.0~11.0。最常見(jiàn)的體系和pH值范圍如下表所示
甘氨酸緩沖液                                      pH值范圍
甘氨酸-HCl                                           2.0~5.0
甘氨酸-NaOH                                      8.0~11.0
甘氨酸-Tris                                          8.0~11.0
甘氨酰胺緩沖液                                     7.8~8.8
甘氨酰甘氨酸緩沖液                               8.0~9.0
甘氨酸緩沖液的優(yōu)點(diǎn):為細(xì)胞成分和各種提取物提供更親近的自然環(huán)境。
甘氨酸緩沖液的缺點(diǎn):類似于磷酸鹽緩沖體系;干擾某些生化反應(yīng)過(guò)程,例如代謝過(guò)程。

 

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