血液分析是動物健康和福利控制中非常重要和強大的診斷工具。它通常在高等脊椎動物中進行,其參考值已經(jīng)確立,但魚類血液學仍需要進一步研究。許多內(nèi)在和環(huán)境因素對魚的血液學值有深遠的影響,使參考值的確定變得困難。此外,由于凝血時間短,魚血通常需要添加抗凝劑??鼓齽┑倪x擇對于獲得可靠的血液檢測值至關(guān)重要。在本研究中,兩種常見的抗凝劑的影響,K 2 EDTA(1.8毫克/毫升)和(18國際單位/毫升),在養(yǎng)殖的斑鱒血液學值褐鱒對產(chǎn)卵季節(jié)的產(chǎn)卵者進行了調(diào)查。
基本血液學分析的結(jié)果,例如壓實細胞體積 (PCV)、血紅蛋白濃度 (HGB)、紅細胞計數(shù) (RBC)、平均紅細胞血紅蛋白 (MCH)、平均紅細胞體積 (MCV)、平均紅細胞血紅蛋白濃度 (MCHC)和白細胞計數(shù) (WBC),在K 2 EDTA和肝素鋰之間進行了比較。在 PCV、MCV 和 MCHC 中觀察到統(tǒng)計學上的顯著差異,而 HGB、RBC、MCH 和 WBC 沒有顯示出這種差異。這些結(jié)果表明肝素鋰提供了更可靠的結(jié)果,因為處理的樣品中的紅細胞有膨脹的趨勢。
乙二胺四乙酸 (EDTA) 的鹽類被國際血液學標準化委員會 (ICSH) 和臨床和實驗室標準研究所 (CLSI) 推薦為血細胞計數(shù)的首選抗凝劑 。EDTA 作為 Ca 2+和 Mg 2+離子的螯合劑。它結(jié)合鈣,對于凝血級聯(lián)中的酶促反應必不可少,從而產(chǎn)生抗凝作用,對細胞形態(tài)的影響最小。EDTA 可以最可靠地保存染色血膜上的細胞,它常用于人類、哺乳動物和其他脊椎動物的常規(guī)血液學測試。它還在魚類中取得了一些成功 。然而,EDTA 鹽有一些缺點。在某些情況下,它們會導致血液溶血,尤其是在用未緩沖的三卡因甲磺酸鹽 (MS 222) 麻醉的標本中。
肝素鹽主要用于臨床生物化學。它阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶(因子 II),從而抑制纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。根據(jù)一些爬行動物和鳥類的 EDTA 保存的血液樣本中溶血的報道很少,建議在對有紅細胞的動物進行血細胞計數(shù)時使用肝素。出于這個原因,許多作者使用肝素作為魚類血液學中首選的抗凝劑。然而,肝素并不能完全阻止白細胞和血小板聚集,這會導致樣本凝固,并且還會產(chǎn)生 Wright 染色的血涂片的藍色背景染色。另外它也比其他抗凝劑更昂貴。
一些研究者觀察到從 EDTA 和肝素鹽中獲得的 HGB 和 RBC 存在顯著差異,肝素鋰比乙二胺四乙酸二鉀更適合用于養(yǎng)殖鱒魚產(chǎn)卵的血液學評估。肝素不會影響紅細胞的大小,從而將溶血的可能性降至最低,與肝素相比,用EDTA處理的血液制成的血液涂片質(zhì)量更高。根據(jù)目前的研究,我們建議K2EDTA可以謹慎地用于血細胞計數(shù)和HGB的測定。為了更好地了解抗凝劑對血液學參數(shù)的影響,還需要進一步的研究。