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吖啶酯與其它化學(xué)發(fā)光試劑的區(qū)別

發(fā)表時(shí)間:2021-04-15

免疫分析CLIA是繼酶免分析技術(shù)(EIA)、放射免疫分析技術(shù)(RIA)、熒光免疫分析技術(shù)(FIA)、時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)(TRFIA)之后新興的免疫分析技術(shù),檢測(cè)速度快、靈敏度高、特異性高且自動(dòng)化程度高。

不同化學(xué)發(fā)光試劑區(qū)別:

并不是CLIA中唯一的化學(xué)發(fā)光試劑,還有魯米諾、異魯米諾、金剛烷二氧環(huán)乙烷、三聯(lián)吡啶釕等。

魯米諾,需要過(guò)氧化物酶如PODHRP的催化,對(duì)反應(yīng)環(huán)境的pH要求以及溫度要求較高;異魯米諾較魯米諾發(fā)光體系發(fā)光效率低,但其苯環(huán)上的氨基可以進(jìn)行官能團(tuán)取代,提高發(fā)光效率并且方便標(biāo)記。

金剛烷二氧環(huán)乙烷,金剛烷體系需要堿性磷酸酶參與,同樣易受環(huán)境pH值、溫度等因素影響。

三聯(lián)吡啶釕是電化學(xué)發(fā)光體系,儀器設(shè)備的性能要求較高,清洗條件要求苛刻。

而吖啶酯屬于直接化學(xué)發(fā)光,不需要酶的催化,且可以直接標(biāo)記蛋白、抗體、核酸等。具有背景低、標(biāo)記工藝簡(jiǎn)單、標(biāo)記后光量子產(chǎn)率不減少、發(fā)光時(shí)間短、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),目前綜合優(yōu)勢(shì)較大。

光澤精,同樣含有吖啶結(jié)構(gòu),與吖啶酯較類似,早期使用較多;還有過(guò)氧草酸酯等,使用較少。

吖啶酯化學(xué)發(fā)光特點(diǎn):

吖啶酯化學(xué)發(fā)光為閃光型,在化學(xué)發(fā)光免疫分析領(lǐng)域與其它技術(shù)相比具有優(yōu)勢(shì),吖啶酯化學(xué)發(fā)光在加入啟動(dòng)劑0.4s后發(fā)射光強(qiáng)度達(dá)到最大,半衰期為0.9s,2s內(nèi)發(fā)光基本結(jié)束,可以實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。吖啶酯標(biāo)記工藝簡(jiǎn)單,標(biāo)記反應(yīng)一步完成,發(fā)光過(guò)程只需要在堿性條件下,經(jīng)過(guò)氧化氫氧化就可以直接發(fā)光,不需要其它發(fā)光催化劑。

為了使吖啶酯適應(yīng)不同的蛋白質(zhì)、抗體、核酸的研究實(shí)驗(yàn),可進(jìn)行官能團(tuán)的取代使其性能更好,比如吖啶磺酰胺、便于標(biāo)記的NHS酯等。根據(jù)不同的官能團(tuán)取代,德晟研發(fā)生產(chǎn)的吖啶酯目前已有6種。

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