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教你如何選擇合適的生物緩沖液

發(fā)表時間:2021-03-23

種類之多我相信不需我多說,不管是懂還是不懂得人都知道。所以我們在選擇上也就存在很多不確定性。不知道哪種才是你需要的,哪種才是適合的。針對這個問題,德晟作為生物緩沖劑的廠家,教你如何選擇。

緩沖范圍

每個緩沖液的pH值范圍內(nèi)的緩沖能力最高。該容量通常由緩沖區(qū)的pKa決定。您必須選擇pKa值接近所需范圍中間值的緩沖液(通常,建議使用pKa值至少在目標pH值的一個pH單位內(nèi)的緩沖液)。

實驗過程中的pH值變化

重要的是要考慮在實驗過程中pH值可能會升高還是降低。如果您期望pH值會增加,則必須選擇pKa稍高于實驗開始時的最佳值的緩沖液。相反的情況也一樣:如果期望pH值降低,則選擇pKa較低的緩沖液。

緩沖液濃度

必須調(diào)整緩沖液的濃度,以具有足夠的容量供實驗系統(tǒng)使用??傊?,如果緩沖液的濃度太低,它將無法穩(wěn)定溶液的pH值。相反,如果濃度太高,則緩沖液很可能會影響實驗。通常,建議使用高于25 mM的濃度。

對于不主動交換氫質(zhì)子的系統(tǒng),通常建議濃度為25-100mM。對于可能發(fā)生質(zhì)子交換的系統(tǒng),建議使用比被交換質(zhì)子的摩爾濃度高20倍的緩沖劑濃度。

在制備緩沖溶液時,切記將溶液濃度調(diào)至預定使用濃度。

溫度變化

必須根據(jù)將要進行實驗的溫度來設置緩沖溶液的pH。溫度直接影響緩沖液的pKa,進而影響系統(tǒng)的pH值和緩沖能力。在生物系統(tǒng)中這種情況可能非常關鍵,在生物系統(tǒng)中,需要準確的氫離子濃度才能使反應系統(tǒng)以最高效率運行。

某些緩沖液(例如PIPES)的pKa對溫度變化不太敏感,但是,其他選項(如TRIS,TAPSTESTricine)受這些變化的影響更大。

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