當前,新型冠狀病毒防控形式仍然十分嚴峻,作為核酸檢測的第一步,樣本采集與保存的重要性毋庸置疑,檢驗業(yè)內(nèi)常說“garbage in, garbage out(垃圾標本出垃圾結(jié)果)”,最重要的影響因素首先是樣品采集。如果樣本采集出了問題,那么后面的各項工作做得再好,其結(jié)果也是無效的,選擇正確的和采集管,可以讓新冠檢測事半功倍!
當前市場上的病毒保存液幾乎都是直接保存活病毒,導(dǎo)致采樣、運輸和檢測中的醫(yī)護人員均面臨較高的感染風險,針對這種情況,抗疫一線非常需要能直接滅活病毒的樣本保存液,但應(yīng)該注意的是:在滅活病毒的同時,還應(yīng)考慮保存液能否穩(wěn)定保存病毒核酸的完整性,避免樣本中的核酸在檢測前降解,造成核酸檢測“假陰性”。德晟不含胍鹽病毒保存液讓“假陰性”風險降至最低。
我們對比了市面上含鹽酸胍成分、含異硫氰酸胍成分的保存液和不含胍鹽成分的康為世紀保存液在37℃條件下保存禽類冠狀病毒的效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)主要成分是胍鹽的保存液,保存效果非常不理想!
同樣都是37℃的條件,保存1-7天后,使用康為世紀保存液,病毒核酸保存效率基本恒定在100%;而使用其他兩種胍鹽成分保存液,病毒核酸的保存效率逐漸降低,到第7天的時候,已經(jīng)低于20%,說明RNA隨著時間推移正在劇烈降解!
胍鹽(異硫氰酸胍或鹽酸胍等)作為一種經(jīng)典的蛋白變性劑,常用于核酸提取中的細胞裂解,也可以達到滅活病毒的效果,但胍鹽成分不具備在常溫條件下保存病毒核酸的能力,極易造成樣本降解,因此不適合用于新冠病毒樣本的保存,所以強烈建議您選擇非胍鹽成分的病毒保存液。
在此,我們呼吁廣大醫(yī)療工作者,如果您的采樣目的是進行核酸檢測,而且不需要培養(yǎng)活病毒,那么在選擇病毒保存液時,需要注意以下幾個方面:
1、采用可以滅活病毒保存液
當前核酸檢測是對樣本中的病毒RNA進行檢測,需要將病毒裂解,所以只要能保證病毒核酸的完整和穩(wěn)定就可以了,不需要保存活病毒。因此,在當前抗擊新冠病毒疫情的形勢下,在樣本采集的同時對病毒進行滅活,是更為理想的選擇。市場上也有部分廠家推出了滅活型的保存液,但所用的滅活成分是胍鹽,對比實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)胍鹽成分保存液不具備在常溫條件下保存病毒核酸的能力,極易造成樣本降解,不適合用于新冠病毒樣本的保存,因此,我們推薦含有非胍鹽的蛋白變性劑成分的病毒保存液,可以滅活病毒并保證病毒核酸在常溫保存不降解。
2、采樣管中的保存液體積要適宜
選擇體積適宜的保存液非常重要:(1)若每個樣本單獨采樣,建議您選用1ml保存液的病毒采樣管,不僅采樣量能滿足下游核酸提取檢測需求,且相比3ml的保存液,其病毒的濃度提高了3倍?、谌暨M行較大規(guī)模初篩混檢,3-5人的拭子樣本放在同一采樣管中,建議您選用3ml保存液的病毒采樣管,使樣本量能滿足下游核酸提取需求,同時提高檢測效率,降低檢測成本。
3、采用可以常溫運輸保存樣本的病毒保存液
因為RNA具有不穩(wěn)定性,傳統(tǒng)病毒采樣管需要在4℃條件下48小時內(nèi)運送至實驗室,如果運輸溫度不達標,可能會造成病毒核酸降解,導(dǎo)致檢測結(jié)果“假陰性”!相比之下,若采用康為世紀可以常溫運輸并穩(wěn)定保存病毒核酸的病毒保存液,則可以解決樣本運輸?shù)碾y題,從而提高檢測結(jié)果的準確性。
4、采用可保護樣本免受高溫滅活影響的病毒保存液
國家衛(wèi)健委相關(guān)指南要求在提取病毒核酸前需要對樣本進行高溫滅活(56℃以上處理30min),但北京疾病預(yù)防控制中心、北京市預(yù)防醫(yī)學研究中心等機構(gòu)在Clinical Chemistry刊發(fā)的論文研究顯示高溫滅活會導(dǎo)致病毒核酸降解,從而降低病毒核酸的檢出率,是導(dǎo)致新冠病毒核酸檢出假陰性率過高的原因之一。經(jīng)實驗驗證,采用德晟病毒樣本保存液保存樣本時,高溫滅活對冠狀病毒核酸完整性無明顯影響。
德晟研發(fā)生產(chǎn)的病毒保存液分為滅活和非滅活型,根據(jù)實驗需求、檢測條件不同選擇對應(yīng)不同的保存液。如有疑問或需求可來電詳詢,選擇德晟病毒保存液是你正確的選擇。