(ChemiLuminescence ,簡(jiǎn)稱為CL)法是分子發(fā)光光譜分析法中的一類,它主要是依據(jù)化學(xué)檢測(cè)體系中待測(cè)物濃度與體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在一定條件下呈線性定量關(guān)系的原理,利用儀器對(duì)體系化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的檢測(cè),而確定待測(cè)物含量的一種痕量分析方法。化學(xué)發(fā)光與其它發(fā)光分析的本質(zhì)區(qū)別是體系產(chǎn)生發(fā)光 (光輻射) 所吸收的能量來源不同。體系產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,必須具有一個(gè)產(chǎn)生可檢信號(hào)的光輻射反應(yīng)和一個(gè)可一次提供導(dǎo)致發(fā)光現(xiàn)象足夠能量的單獨(dú)反應(yīng)步驟的化學(xué)反應(yīng)。
化學(xué)發(fā)光分析測(cè)定的物質(zhì)可以分為三類:第一類物質(zhì)是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中的反應(yīng)物;第二類物質(zhì)是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中的催化劑、增敏劑或抑制劑;第三類物質(zhì)是偶合反應(yīng)中的反應(yīng)物、催化劑、增敏劑等。這三類物質(zhì)還可以通過標(biāo)記方式用來測(cè)定其他物質(zhì),進(jìn)一步擴(kuò)大化學(xué)發(fā)光分析的應(yīng)用范圍。
化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的發(fā)光類型通常分為閃光型(flash type)和輝光型(glow type)兩種。閃光型發(fā)光時(shí)間很短,只有零點(diǎn)幾秒到幾秒。輝光型又稱持續(xù)型,發(fā)光時(shí)間從幾分鐘到幾十分鐘,或幾小時(shí)至更久。閃光型的樣品必須立即測(cè)量,必須配以全自動(dòng)化的加樣及測(cè)量?jī)x器。輝光型樣品的測(cè)量可以使用通用型儀器,也可以配有全自動(dòng)化儀器。
化學(xué)發(fā)光免疫分析
化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測(cè)分析技術(shù)。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時(shí)間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項(xiàng)最新免疫測(cè)定技術(shù)。
化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)相比酶聯(lián)免疫是定性檢測(cè),在臨床治療上具有重大意義。以HBsAg的檢測(cè)為例,如果采用化學(xué)發(fā)光法,可以將定量結(jié)果<=100IU/mL作為停藥指標(biāo),并定期隨訪檢測(cè)HBsAg定量值。
酶聯(lián)免疫與化學(xué)發(fā)光的比較
酶聯(lián)免疫 | 化學(xué)發(fā)光 | |
原理 | 將醫(yī)用酶同樣本反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)物顏色的變化程度分析各類指標(biāo),確定診斷結(jié)果 | 將抗原抗體同樣本結(jié)合,然后由磁珠捕捉形成的反應(yīng)物,再加入發(fā)光促進(jìn)劑,加大反應(yīng)物自發(fā)光速度和強(qiáng)度,用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x測(cè)量光子數(shù)量,據(jù)此診斷 |
優(yōu)點(diǎn) | 技術(shù)成熟,成本最低 | 精確度高,無污染,檢測(cè)速度快,技術(shù)日益成熟 |
缺點(diǎn) | 操作復(fù)雜,耗時(shí)長(zhǎng),反應(yīng)試劑殘留存在放射性污染 | 成本相對(duì)高,技術(shù)成熟度在國內(nèi)相對(duì)弱 |
發(fā)展方向 | 是國內(nèi)主流技術(shù),但未來逐步被化學(xué)發(fā)光替代 | 代表了免疫診斷的發(fā)展方向 |