魯米諾（luminol），又名發(fā)光氨，它常溫下是一種黃色晶體或者米黃色粉末，是一種比較穩(wěn)定的化學(xué)試劑。同時，魯米諾又是一種強酸，對眼睛、皮膚、呼吸道有一定刺激作用。

它是一種最古老的和最常用的試劑，在堿性條件下可被過氧化物氧化，同時發(fā)光，魯米諾和過氧化物之間的氧化還原反應(yīng)需要催化劑，這種催化劑一般為多價金屬離子、過氧化物酶如鐵、辣根過氧化物酶等，此種方法常用于檢測過氧化物、重金屬、過氧化物酶的含量，以及由此衍生的檢測自由基、進行毒物分析和基于過氧化物酶和葡萄糖氧化酶的分析方法。

在通常情況下與過氧化氫在某些催化劑存在時化學(xué)發(fā)光反應(yīng)非常迅速。最常用催化劑是金屬離子，在很大濃度范圍內(nèi)，金屬離子濃度與發(fā)光強度成正比，從而可進行某些金屬離子的化學(xué)發(fā)光分析，利用這一反應(yīng)可以分析那些含有金屬離子的有機化合物，達到很高的靈敏度。其次是利用有機化合物對魯米諾化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的抑制作用，測定對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)具有猝滅作用的有機化合物。其三是通過偶合反應(yīng)間接測定無機或有機化合物。

魯米諾發(fā)光原理

一是次氯酸鈉氧化魯米諾使其發(fā)光；

二是過氧化氫與次氯酸鈉反應(yīng)生成氧氣氧化魯米諾使其發(fā)光：

首先是次氯酸鈉和過氧化氫反應(yīng)的方程式：NaClO+ H2O2 == NaCl + O2 + H2O

其次，魯米諾與氫氧化物反應(yīng)時生成了一個雙負離子（Dianion），它可被過氧化氫分解出的氧氣氧化，產(chǎn)物為一個有機過氧化物。該過氧化物很不穩(wěn)定，立即分解出氮氣（魯米諾被有機氧化劑如二甲基亞砜氧化后不是生成氮氣，而是生成含氮有機物），生成激發(fā)態(tài)的3-氨基鄰苯二甲酸。激發(fā)態(tài)至基態(tài)轉(zhuǎn)化中，釋放的能量以光子的形式存在，波長位于可見光的藍光部分。

魯米諾（發(fā)光氨）作為化學(xué)發(fā)光試劑常用于檢測之中，不過，有些人會問，魯米諾在應(yīng)用的時候一般會選擇哪些發(fā)光檢測的方法呢？德晟告訴你的3種方法，分別為催化劑加快發(fā)光，抑制劑間接測定，通過偶合間接測定。

催化劑加快發(fā)光方法估計都明白，魯米諾發(fā)光檢測發(fā)光速度太慢，所以在檢測中常要加入一些催化劑來加速。在化學(xué)發(fā)光免疫分析中我們會經(jīng)常用到的催化劑是過氧化物，特別是辣根過氧化物酶，而除了辣根酶，催化劑還包括一些金屬配合物、過渡金屬離子，比如血紅蛋白、鐵離子、錳離子等。

有加速就有抑制，有些有機物會抑制劑來抑制魯米諾的發(fā)光，如含有酚羥基團的還原性化合物，那就可以利用這點對此類有機物進行間接測定，這便是第二種測定方法。

通過偶合間接測定的方法是指將能夠產(chǎn)生或者消耗化學(xué)發(fā)光反應(yīng)物的一個反應(yīng)與另一個化學(xué)發(fā)光反應(yīng)結(jié)合起來,從而可以實現(xiàn)某些物質(zhì)的間接化學(xué)發(fā)光測定。在測定某些底物酶的純度的時候會用到此方法。